操作程序
(1)將雌鼠和雄鼠按 1:1 或 2:1 的比例同籠飼養(yǎng)。每日晨觀察陰栓(或陰道涂片)。查出
陰栓或精子的當(dāng)天定為孕期零天。如 5d 內(nèi)未交配,調(diào)換雌鼠。查出的孕鼠按上述隨機(jī)分組,
并進(jìn)行稱重和編號。
(2)在大、小鼠孕期 6d~15d 期間,每天用灌胃法給予受試物。分別于孕期0d、6d、10d、
15d 和 20d 稱重孕鼠,并根據(jù)體重調(diào)整受試物給予量。注意觀察并記錄孕鼠的毒性反應(yīng)。
(3)大鼠于孕期第 20d,小鼠于孕期第 18d,用頸椎脫臼法處死。剖腹,取出子宮稱重,
檢查活胎、吸收胎、早期死胎和晚期死胎數(shù)。
(4)逐個(gè)記錄活胎鼠的性別、體重、身長和尾長。外觀檢查頭面部、軀干部、四肢等有無
畸形,諸如皮下出血、露腦、腦膨出、眼部畸形(無眼或開眼等)、鼻孔擴(kuò)大、單鼻孔、唇裂、脊柱裂、
四肢和尾畸形、肛門閉鎖等。
(5)每窩取約 1/2~2/3 活胎鼠,用眼科鑷剝皮。取出內(nèi)臟(注意勿拉斷肋骨),去掉后頸
和兩肩胛骨之間的脂肪塊。將胎鼠放入茜素紅溶液染色。當(dāng)天搖動(dòng)玻璃瓶 2 次~3 次。待骨
骼染成紅色時(shí)為止。將胎鼠換入透明液 A 中 1d~2d,換入透明液 B 中 2d~3d。待胎鼠骨骼
已染紅,而軟組織的紫紅色基本褪去,可換置甘油中。
(6)將染好的標(biāo)本連同甘油一并倒入含水平皿內(nèi),在解剖顯微鏡下,用透射光源,先觀
察胎鼠全身,然后逐步檢查:①頭骨、胸骨、脊椎骨、肋骨和四肢等有無骨化不全、骨化遲緩和
其他缺陷。②觀察脊椎骨有無缺失、融合、縱裂等畸形;③觀察胸骨的發(fā)育和數(shù)目,有無胸骨
缺失等;④檢查肋骨有無融合肋、分叉肋、肋骨中斷、缺肋、短肋、波狀肋、多肋畸形等;⑤.后
檢查四肢骨畸形。
(7)每窩取約 1/3~1/2 活胎鼠浸入固定液2 周,作內(nèi)臟檢查。將已固定的胎鼠用水沖凈,
仰放于石蠟板上。剪去四肢和尾,用刀片在頭頸部常規(guī)共切 4 刀,再用剪刀剖開胸、腹腔。
著重檢查:①有無裂舌、雙叉舌、裂腭及眼、鼻和腦部的畸形;②是否出現(xiàn)右位心、心臟過大、
肺過大或過小等畸形;③ 消化系統(tǒng)和泌尿生殖系統(tǒng)各器官的大小、形狀以及位置;
④ 有
無腎盂積水,雙側(cè)有無睪丸,以及子宮發(fā)育不全等畸形。